Annexin V-FITC細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit)是用FITC標記的重組人Annexin V來檢測細胞凋亡時出現(xiàn)在細胞膜表面的磷酯酰絲氨酸的一種細胞凋亡檢測試劑盒??梢允褂昧魇郊毎麅x、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設備進行檢測。 Annexin是一類廣泛分布于真核細胞細胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷酯結(jié)合蛋白,參與細胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導。但僅Annexin V被報道可以調(diào)控一些PKC的活性。
Annexin V選擇性結(jié)合磷酯酰絲氨酸(phosphatidylserine,簡稱PS)。磷酯酰絲氨酸主要分布在細胞膜內(nèi)側(cè),即與細胞漿相鄰的一側(cè)。在細胞發(fā)生凋亡的早期,不同類型的細胞都會把磷酯酰絲氨酸外翻到細胞表面,即細胞膜外側(cè)。磷酯酰絲氨酸暴露到細胞表面后會促進凝血和炎癥反應。而Annexin V和外翻到細胞表面的磷酯酰絲氨酸結(jié)合后可以阻斷磷酯酰絲氨酸的促凝血和促炎癥反應活性。
用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標記的Annexin V,即Annexin V-FITC,就可以用流式細胞儀或熒光顯微鏡非常簡單而直接地檢測到磷酯酰絲氨酸的外翻這一細胞凋亡的重要特征。
本試劑盒還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液,碘化丙啶可以染色壞死細胞或凋亡晚期喪失細胞膜完整性的細胞,呈現(xiàn)紅色熒光。對于壞死細胞,由于細胞膜的完整性已經(jīng)喪失,AnnexinV-FITC可以進入到細胞漿內(nèi),與位于細胞膜內(nèi)側(cè)的磷酯酰絲氨酸結(jié)合,從而也使壞死細胞呈現(xiàn)綠色熒光。
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